环状RNA（circRNA）构建瞬时CAR-T细胞可以减轻传统基于病毒载体的CAR-T方法的局限性，如复杂的过程和长期副作用。
目前，常用的方法包括电穿孔和脂质纳米粒（LNPs）。相比之下，电穿孔是一种成熟的技术，可用于将核酸递送到包括T细胞、巨噬细胞和树突状细胞在内的原代细胞中。
近日，北京大学人民医院邱满堂、王俊联合南京医科大学附属医院孙明等人团队在Experimental Hematology & Oncology期刊上发表研究论文：Engineered circular RNA-based DLL3-targeted CAR-T therapy for small cell lung cancer。研究确立了基于circRNA-电穿孔策略构建CAR-T疗法，其可有效靶向治疗小细胞肺癌（SCLC）小鼠模型，效果显著优于mRNA，体现了其作为小细胞肺癌新治疗策略的潜力。
构建基于circRNA的CAR-T细胞
研究首先重新确认了circRNA的优势特征，重点验证了其稳定性和蛋白质表达效率。DLL3 是SCLC的一个重要靶点，研究随后构建了编码anti-DLL3 CAR的环状RNA。然后通过优化电穿孔条件，采用circRNA-电穿孔策略，有效地将circRNA递送到人类原代T细胞中，然后成功产生靶向DLL3的CAR-T细胞。
基于circRNA的CAR-T疗效
在体外和体内模型中，包括皮下和原位SCLC小鼠模型，与基于mRNA的CAR-T细胞相比，基于circRNA的CAR-T对SCLC的疗效更高。体内研究显示，基于circRNA的CAT-T细胞具有增强的肿瘤杀伤作用，人小细胞肺癌肿瘤完全消除。这些结果强调了circRNA在CAR-T细胞治疗中的治疗优势。
circRNA工程CAR-T细胞在小鼠皮下肿瘤模型中的强效作用。
总结
研究强调了circRNA技术与电穿孔技术的整合，成功构建CAR-T细胞。与基于mRNA的CAR-T细胞相比，基于circRNA的CAR-T表现出更强大的抗肿瘤活性。研究确立了使用circRNA电穿孔平台构建CAR-T细胞的可行性，并提出了一种靶向DLL3治疗小细胞肺癌的新治疗策略。
研究通过构建含目标基因、T7启动子、IRES、PIE构建体和间隔序列的质粒，线性化质粒并扩增后，通过T7酶体外转录合成环状RNA。类似地，吉赛生物可提供体外合成的一系列工具酶，助力高效的体外转录和circRNA合成，加速RNA创新疗法研发。
原文链接：https://ehoonline.biomedcentral.com/articles/10.1186/s40164-025-00625-8?sessionid=-1556934703
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