Cell Death Dis | circIFNGR2或成为抑制结直肠癌患者耐药的一种新的治疗策略

鉴于miR-30b在CRC中作为抑癌基因发挥作用，作者接下来进行了一系列细胞功能测定，以探索miR-30b是否可以逆转circIFNGR2对CRC细胞功能的影响。正如预期的那样，无论是在体实验还是离体实验，均证明，miR-30b对CRC细胞侵袭和增殖凋亡能力的影响同circIFNGR2相反，并且circIFNGR2的加入，能够逆转miR-30b对CRC细胞的作用。综上所述，circIFNGR2可以通过靶向miR-30b在体内和体外影响CRC细胞的功能。

作者进一步验证了circIFNGR2、miR-30b和KRAS之间的关系。结果显示，内源性miR-30b被靶向KRAS的生物素标记探针拉低。在HCT8和CACO2细胞中进行的Anti-Ago2 RIP实验显示，抗ago2对miR-30b的抑制作用下，KRAS大量富集。提示miR-30b可下调KRAS的表达。然而，在CRC细胞中转染circIFNGR2逆转了KRAS的下调。相反，在circIFNGR2过表达组中，加入miR-30b则降低了KRAS的水平。综上所述，虽然miR-30b可以下调KRAS的表达，但circIFNGR2可以逆转miR-30b下调KRAS的作用。

考虑到circIFNGR2有助于CRC中癌细胞的特性，作者接下来研究circIFNGR2是否导致西妥昔单抗治疗耐药。CCK8、transwell和集散形成实验显示circIFNGR2增强了CRC细胞的增殖和迁移能力。然而，西妥昔单抗治疗后，对照CRC细胞的增殖和迁移能力下降，而circIFNGR2过表达的CRC细胞的增殖和迁移能力未下降。这提示，circIFNGR2过表达可促进西妥昔单抗化疗耐药性。CRC细胞创面愈合试验的统计分析表明，西妥昔单抗处理后，未转染circIFNGR2的细胞迁移能力明显降低，而circIFNGR2过表达组细胞迁移能力无明显影响；流式细胞仪检测凋亡的结果也与此一致。体内裸鼠异种实验也进一步印证了circIFNGR2在西妥昔单抗耐药中的作用。综上所述，circIFNGR2通过靶向KRAS诱导CRC细胞对西妥昔单抗的耐药。