袁鹏飞博士
首席技术官/研究体系负责人
ASGCT会议
会议主题:基因靶向和基因修正：新技术
报告时间:北京时间2023年5月19日星期五5:00am-5:15am
摘要编号:233
摘要：
从理论上讲，可编程的A到G编辑可以治疗近一半由单核苷酸多态性(SNPs)引起的遗传病，包括那些导致过早终止密码子或剪接位点突变的疾病。作为一种重要的转录后修饰，作用于RNA的腺苷脱氨酶（ADAR）介导的RNA编辑广泛存在于真核细胞中。在这一过程中，腺苷经过脱氨基变成肌苷，肌苷在随后的剪接或翻译机制中被识别为鸟苷，从而实现遗传信息的重写。目前已经开发出几种依赖ADAR的RNA碱基编辑工具。其中，LEAPER及其升级版LEAPER2.0实现了精确、高效和126分子疗法（2023年4月基因靶向和基因校正的第31卷第4S1期:新技术通过工程环状arRNAs(circ-arRNAs)和内源性ADAR对RNA转录物进行长效编辑）。然而，鉴于内源性ADAR的表达因器官和物种而异，并且递送途径的选择尚未经过彻底验证，因此目前尚不清楚这种方法用于治疗是否现实。
在本文中，博雅辑因报告了LEAPER2.0可以通过AAV对NHPs进行高效和安全的RNA编辑。具体而言，博雅辑因测试了三种剂量(3×1012,1×1013和3×1013vg/kg)将circ-arRNA递送到NHPs中，在感染后1-3个月内，肝脏的总体编辑效率达到了约50%。实验组的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性水平、体重和细胞因子分析均与对照组相当，肝脏切片显示整个实验过程中无肝损伤。为了测试circ-arRNA介导的靶向RNA编辑是否影响内源性ADAR活性，博雅辑因在两个3×1013vg/kgNHPs和对照组中进行了AEI(Alu editing index)测定。结果表明，两者的AEI无显著差异，表明内源性ADAR编辑不受影响。与基于ADAR2DD(ADAR2脱氨酶结构域)的RNA编辑相比，内源性ADAR-based RNA编辑在转录组水平上具有特异性。博雅辑因在NHP肝脏中再次进行了全转录组RNA测序分析，只检测到18个潜在的脱靶位点，其中大多数要么位于3’UTR区域，要么引起同义突变。最小自由能分析表明，这些脱靶命中都没有与circ-arRNA形成稳定的双链。因此，这些位点不太可能是序列依赖的脱靶位点。综上所述，结果表明，通过AAV递送的LEAPER2.0能够在NHP动物中实现高效编辑，并具有潜在的长期持久性，这在治疗和生物医学研究中显示出广泛的适用性。
关于博雅辑因
博雅辑因(EdiGene,Inc.)是一家专注基因编辑疗法开发、处于临床阶段的生物医药企业，致力于为血液疾病、肿瘤、眼科、中枢神经系统等疾病领域患者带来变革型疗法。公司基于在基因编辑、高通量基因组编辑筛选和生物信息等领域的前沿科技创新实力，推进国际领先的体外和体内基因编辑疗法开发。公司已经建立了包括体外疗法造血干细胞平台、体外疗法通用型CAR-T平台、体内疗法RNA碱基编辑平台在内的多个治疗平台。
